Che cos'è il lettore di micropiastre ELISA?
Il lettore di micropiastre, ovvero il test di immunoassorbimento enzimatico, è uno strumento speciale per il test di immunoassorbimento enzimatico. In effetti, è uno speciale colorimetro o spettrofotometro fotoelettrico travestito e il suo principio di funzionamento di base è sostanzialmente lo stesso della struttura principale e del colorimetro fotoelettrico. Può essere semplicemente diviso in due categorie, semiautomatico e completamente automatico, ma i loro principi di funzionamento sono sostanzialmente gli stessi. Il suo nucleo è un colorimetro, ovvero il metodo colorimetrico viene utilizzato per analizzare il contenuto di antigene o anticorpo. La determinazione ELISA generalmente richiede che il volume finale della soluzione di test sia inferiore a 250μL e il test non può essere completato con un colorimetro fotoelettrico generale, quindi ci sono requisiti speciali per il colorimetro fotoelettrico nel lettore di micropiastre.
Principio
Il lettore di micropiastre è in realtà un colorimetro fotoelettrico o uno spettrofotometro sotto mentite spoglie e il suo principio di funzionamento di base è sostanzialmente lo stesso della struttura principale e del colorimetro fotoelettrico. La figura mostra il lavoro di un lettore di micropiastre a campionamento automatico a canale singolo. Diagramma schematico. L'onda luminosa emessa dalla lampada sorgente luminosa viene trasformata in luce monocromatica dal filtro o monocromatore, ed entra nel provino in esame nel polo plastico microporoso. Parte della luce monocromatica viene assorbita dal campione e l'altra parte viene trasmessa attraverso il campione Illuminato al fotorilevatore, il fotorilevatore converte i diversi segnali luminosi del campione da testare in segnali elettrici corrispondenti. I segnali elettrici vengono elaborati mediante preamplificazione, amplificazione logaritmica e conversione da analogico a digitale. Entra nel microprocessore per l'elaborazione e il calcolo dei dati, e infine visualizza i risultati dal display e dalla stampante. Il microprocessore controlla anche il movimento del meccanismo di azionamento meccanico nella direzione X e nella direzione Y per spostare la micropiastra attraverso il circuito di controllo, in modo da realizzare il processo di rilevamento automatico del campionamento. Altri lettori di micropiastre utilizzano il movimento manuale della micropiastra per il rilevamento, quindi il meccanismo di azionamento meccanico e il circuito di controllo nelle direzioni X e Y vengono omessi, in modo che lo strumento sia più piccolo e la struttura sia più semplice.
La micropiastra è una piastra di plastica trasparente appositamente utilizzata per posizionare il campione da testare. La piastra ha più file di piccoli fori di dimensioni uniformi e l'antigene o l'anticorpo corrispondente è incorporato nel foro. Ogni piccolo foro può contenere qualche decina di millilitri di soluzione.
La luce è un'onda elettromagnetica. La lunghezza d'onda di 100 nm-400 nm è chiamata luce ultravioletta, la luce tra 400 nm e 780 nm può essere osservata dall'occhio umano e la lunghezza d'onda maggiore di 780 nm è chiamata luce infrarossa. Le persone possono vedere i colori solo perché la luce colpisce l'oggetto e viene riflessa dall'oggetto. Le piante verdi sono verdi perché la maggior parte delle piante assorbe la luce rosso-arancione e la luce blu-viola, ma non assorbono e riflettono il verde, quindi le piante appaiono verdi. Il principio della misurazione del lettore di micropiastre consiste nel rilevare l'assorbanza dell'analita a una lunghezza d'onda specifica.
Struttura
Esistono piastre da 40 pozzetti, piastre da 55 pozzetti, piastre da 96 pozzetti e così via. Strumenti diversi utilizzano orifizi diversi, che possono essere testati uno per uno o riga per riga.
La luce monocromatica utilizzata dal lettore di micropiastre può essere ottenuta tramite un filtro coerente o lo stesso monocromatore di uno spettrofotometro. Quando si utilizza un filtro come dispositivo di filtraggio, è lo stesso di un normale colorimetro. Può essere posizionato davanti alla micropiastra o dietro la micropiastra. Dopo il condensatore, il diaframma raggiunge il riflettore, viene riflesso dal riflettore a 90° e attraversa verticalmente la soluzione colorimetrica, quindi inviato attraverso il filtro. Alla fotocellula.
Dal diagramma a blocchi di lavoro e dal diagramma del percorso ottico del lettore di micropiastre, si può vedere che presenta le seguenti differenze con i normali colorimetri fotoelettrici:
(L) Il contenitore per la soluzione colorimetrica da testare non utilizza più una cuvetta, ma una micropiastra di plastica. La micropiastra è solitamente realizzata in materiale di polietilene trasparente, che ha un forte effetto di adsorbimento sull'antigene e sull'anticorpo, quindi viene utilizzata Agisce come vettore di fase solida.
⑵Poiché la micropiastra di plastica contenente il campione è porosa su più file, la luce può passare solo verticalmente, quindi il raggio di luce del lettore di micropiastre passa attraverso la soluzione da testare e la micropiastra verticalmente. Il fascio luminoso può essere dall'alto verso il basso oppure può attraversare il fluido colorimetrico dal basso verso l'alto.
⑶ I lettori di micropiastre di solito non solo usano A, ma talvolta usano anche densità ottica OD per esprimere l'assorbanza. I lettori di micropiastre possono essere suddivisi in due tipi: monocanale e multicanale e il singolo canale è diviso in due tipi: automatico e manuale. Strumento di tipo automatico C'è un meccanismo di azionamento meccanico nelle direzioni X e Y, che può inviare i piccoli fori della micropiastra L uno per uno sotto il raggio per il test, e il tipo manuale utilizza il movimento manuale della micropiastra per la misurazione.
Sulla base del lettore di micropiastre a canale singolo, è stato sviluppato un lettore di micropiastre multicanale. Questo tipo di lettore di micropiastre è generalmente automatizzato. Non ha più raggi e più fotorivelatori, come uno strumento a 12 canali con 12 raggi o 12 sorgenti luminose, 12 rilevatori e 12 amplificatori, sotto l'azione del dispositivo di azionamento meccanico in direzione X, vengono rilevati 12 campioni in un riga. La velocità di rilevamento del lettore di micropiastre multicanale è elevata, ma la sua struttura I prezzi più complessi sono anche più alti.
Campo di applicazione del lettore di micropiastre
Test ematologico Test degli anticorpi correlati alle piastrine PAIgA, PAIgG, PAIgM
Determinazione del D-Dimero D-Dimero
Determinazione dei prodotti di degradazione della fibrina sierica FDP
Determinazione di T3, T4 con triiodotironina e tetraiodotironina
Test immunologico Determinazione della proteina C-reattiva CRP
Determinazione delle immunoglobuline IgD, IgE
Determinazione degli immunocomplessi circolanti CIC
Determinazione del fattore reumatoide IgG, IgA, IgM RF
Anticorpo anti-tireoglobulina, determinazione dell'anticorpo microsomiale TG, TM
Rilevazione immunologica del cancro del tumore Determinazione dell'alfa-fetoproteina AFP
Determinazione dell'antigene carcinoembrionale CEA
Determinazione dell'antigene prostatico specifico PSA
Determinazione del cancro del pancreas, cancro delle vie biliari, cancro gastrico CA19-9
Determinazione del cancro ovarico CA125
Determinazione del cancro al seno CA15-3
Determinazione del carcinoma a cellule squamose della cervice SCC
Rilevazione di tumori multipli del midollo osseo
Determinazione del cancro alla tiroide hTG
Test immunologico malattie infettive, test sierologico epatite A, anti-HAV-IgM
Test sierologico per l'epatite B Due paia e mezzo
Rilevazione sierologica dell'epatite C Anti-HAV-IgG, anti-HCV-IgM
Rilevazione sierologica dell'epatite D Anti-HDV-IgG, anti-HDV-IgM
Rilevazione sierologica dell'epatite E Anti-HEV-IgG
Rilevazione di anticorpi contro la febbre emorragica con sindrome renale HFRS-IgG
Rilevamento di anticorpi IgM . contro il virus dell'encefalite giapponese
Rilevamento di anticorpi contro il virus dell'immunodeficienza umana (cioè, AIDS regionale) HIV β 2 M
Test di funzionalità delle cure prenatali e postnatali Test del virus del toxoplasma TOXO
Rilevamento del virus della rosolia RV
Rilevamento del citomegalovirus CMV
Rilevamento del virus dell'herpes simplex Anti-HSV (Ⅰ, Ⅱ)
Altri possono anche eseguire test genetici e residui animali, articoli per l'ispezione di residui di pesticidi, ecc.
