La tecnologia di classificazione delle cinque cellule del sangue è un'applicazione completa di ottica, meccanica, meccanica dei fluidi, computer elettronici, biologia cellulare, immunologia e altre discipline. Consente alla soluzione misurata di fluire attraverso l'area di misurazione e rilevare le proprietà fisiche e chimiche di ogni cellula una per una. Un metodo per la rapida determinazione quantitativa e l'analisi di cellule o sottospecie fluenti ad alta velocità. Può analizzare migliaia di cellule in un secondo e misurare più parametri di cellule contemporaneamente. Il metodo di impedenza viene utilizzato anche nell'analizzatore ematologico di cinque classi, il cosiddetto metodo di impedenza del flusso della sheath.
Su un contatore convenzionale di globuli sanguigni, i globuli rossi (RBC) e le piastrine (PLT) condividono un canale di misurazione e il principio di misurazione del contenuto di emoglobina (HGB) è lo stesso in qualsiasi tipo e grado di strumento. Esiste un canale dedicato per il conteggio e la classificazione dei globuli bianchi. Ora introdurremo brevemente i metodi tecnici e i principi utilizzati in ogni elemento di test sull'analizzatore.
1. Determinazione del contenuto di emoglobina
La determinazione del contenuto di emoglobina è aggiungere un agente emolitico al sangue diluito per rilasciare emoglobina dai globuli rossi. Questi ultimi si combinano con l'agente emolitico per formare una derivata dell'emoglobina, che entra nel sistema di test dell'emoglobina e lo confronta a una lunghezza d'onda specifica (di solito 530-550nm). Il cambiamento di colore e assorbanza è proporzionale al contenuto di Hb nel liquido e lo strumento può visualizzare la concentrazione di Hb.
Diverse serie di analizzatori di sangue hanno formule diverse per supportare gli agenti emolitici, e anche i derivati dell'emoglobina formata sono diversi, ma la maggior parte degli spettri di assorbimento massimo sono vicini a 540nm. Negli ultimi anni, molti analizzatori di fascia alta hanno adottato il metodo di scattering della luce laser per l'analisi dell'emoglobina dei singoli globuli rossi per ridurre al minimo l'influenza di alta WBC, chiloemia, alta bilirubina, ecc. sulla colorimetria HBG.
2. Rilevamento di globuli rossi e piastrine
Il rilevamento dei globuli rossi è una parte importante dell'analizzatore del sangue. In passato, il rilevamento dei globuli rossi utilizzava principalmente il metodo di impedenza per contare il numero e il volume dei globuli rossi per ordinare segnali di diverse dimensioni e stampare l'istogramma di distribuzione del volume dei globuli rossi. Tuttavia, una combinazione di ottica e impedenza elettrica viene ora utilizzata per eseguire analisi tridimensionali (3D) sul volume dei globuli rossi al fine di ottenere risultati più accurati.
Ad esempio, ADVIA 120 di Bayer utilizza lo scattering della luce per rilevare i globuli rossi e utilizza lo scattering della luce in avanti ad angolo basso e lo scattering ad alto angolo di due sistemi di misurazione per misurare 1 globulo rosso contemporaneamente e misura il volume e il numero totale di un singolo globulo rosso in base alle dimensioni dell'energia di conversione della luce ad angolo basso; Lo scattering della luce ad alto angolo può ottenere una singola concentrazione di emoglobina, che può ottenere con precisione i valori di misurazione MCV (volume medio dei globuli rossi), MCH (contenuto medio di emoglobina), MCHC (concentrazione media di emoglobina) e disegnare diagrammi di dispersione dei globuli rossi, volume singolo dei globuli rossi e globuli rossi L'istogramma del contenuto interno di Hb e calcolare i parametri come RWD (larghezza di distribuzione del volume dei globuli rossi) , HDW (larghezza di distribuzione dell'emoglobina dei globuli rossi).
A causa dell'ovvia differenza nel volume di piastrine e globuli rossi, è facile distinguere i segnali fotoelettrici misurati dai due allo stesso tempo con una soglia limitata. Pertanto, fino ad ora, è stato utilizzato un sistema di analisi comune per gli esami piastrinica e dei globuli rossi nell'analisi del sangue intero. Tuttavia, i segnali di misurazione delle piastrine e dei globuli rossi spesso si incrociano. Ad esempio, il segnale di impulso di grandi piastrine può essere scambiato per globuli rossi e contati, e il segnale di impulso di piccoli globuli rossi può entrare nel canale piastrinica, causando errori sperimentali. Vari produttori di analizzatori ematologici utilizzano una varietà di tecnologie avanzate per ridurre l'interferenza del conteggio delle piastrine, come la tecnologia di flusso di sweep.
Tecnologia di flusso di sweep (flusso di sweep): poiché piastrine e globuli rossi sono contati nello stesso globulo di conteggio, i globuli rossi sono di grandi dimensioni e formeranno un grande impulso quando passano attraverso la zona centrale di induzione del conteggio. Se c'è un riflusso, genererà anche un rientro a causa della corrente parastuosa Il piccolo impulso formato sul bordo dell'area di rilevamento consente all'elettrodo di percepire un piccolo impulso equivalente alla dimensione delle piastrine, che aumenterà falsamente il numero di piastrine. La tecnologia del flusso di sweep è quella di contare i globuli rossi e le piastrine allo stesso tempo, c'è un flusso liquido stabile dietro il buco di conteggio dei globuli rossi, in modo che i globuli rossi possano essere lavati via immediatamente per evitare di tornare nell'area di induzione per essere conteggiati come piastrine.
